q日Q我校质量与安全工程学院郭良宏团队在国际知名学术期刊Biosensors and Bioelectronics上发表题为“A Cathodic Photoelectrochemical Immunoassay with Dual Signal Amplification for the Ultrasensitive Detection of DNA Damage Biomarkers”的论文Q报道团队开发的DNA损伤标志物高灉|度光电化学传感检方法。论文第一作者ؓ我校质量与安全工E学院青q教师张红博士Q通讯作者ؓ李敏杰副教授、郭良宏研究员?/p>
化学品的毒性筛查和风险评估对生态安全和人类健康臛_重要。尤其是基因毒性物质，因ؓ它与H变性，致癌性和癌症密切相关。目前化合物的基因毒性评价主要是通过动物试验和细胞测试方法进行的Q虽然这些方法已被广泛应用，但其费用高昂、周期长Q不适合大批量化合物的毒性筛查。针对这些方法的不Q近q来国内外工作者提ZZ生物标志物的分子方法，其中酸化组蛋白H2AX (H2AX)是DNA双链断裂Q最严重的DNA损伤形式Q的生物标志物，同时也是一U早期敏感的基因毒性效应标志物。迄今ؓ止，已经开发了各种用于H2AX的技术，其是免疫技术，如免疫印qV免疫荧光显微镜、流动分析和酶联免疫分析{。o人遗憄是，q些Ҏ仍然存在一些缺炏V例如，预处理步骤繁琐、耗时Q动态范围有限，灉|度低{。因此，开发快速、超灉|的分析方法进行准、可靠的H2AX十分迫切?br>
本工作开发了一U具有双信号攑֤的新型阴极光电化?PEC)免疫分析法，用于快速和灵敏地细胞裂解液中的H2AXQ最l实现基因毒性化合物的快速筛查和毒性评估。利用二?金纳c颗_?葡萄p氧化酶p偶联物作为标记检抗体，首先?6孔板上进行了针对H2AX的夹心免疫反应。共轭物的引入提高了葡萄p氧化酶对葡萄糖的催化性能Q进而增加了H2O2的生，提供了信h大的W一个机Ӟ接着Q将含有H2O2的免疫反应物注入电解池中，q行光电化学反应。H2O2作ؓ电子受体Q可在富含氧IZ的Bi2+xWO6光电阴极上发生光q原反应Q?攑֤光电，此外Q氧IZ既是H2O2的吸附位点，又是H2O2的活化位点，从而进一步增Z光电，Zh大提供了另一U机制?Z此，建立了γH2AX的超灉|^収ͼU性范围ؓ0.01-500 ng/mLQ检出限?.87 pg/mL (S/N=3)Q比现有传感方法的灉|度提高了30倍。通过暴露于已知基因毒性化学物质的l胞裂解液中的γH2AXQ验证了该测定方法的实用性。本工作为基因毒性化学品的筛查提供了一个快速、可靠的工具Qƈ为环境风险评估开辟了一条新的道路?/p>
该工作得到国家自然科学基?22036005)Q浙江省重点研发计划目Q?021C03057Q的支持?/p>
全文链接Qhttps://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0956566322010922
